檢驗(yàn)結(jié)果是臨床醫(yī)師在診療過(guò)程中所需要的重要信息,臨床醫(yī)師可以根據(jù)這些檢驗(yàn)結(jié)果及病人的臨床情況來(lái)區(qū)分疾病的不同階段,觀察疾病的變化,判斷預(yù)后或觀察療效。所以分析前階段樣本的質(zhì)量保證是直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果能否真實(shí)客觀地反應(yīng)患者當(dāng)前病情的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。
1.病人狀態(tài)
一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本,如患者處于高度緊張的狀態(tài)時(shí),可使血紅蛋白、白細(xì)胞增高。由于勞累或受冷等刺激、也可見白細(xì)胞的增高。運(yùn)動(dòng)能影響許多項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果?;顒?dòng)的影響可分暫時(shí)和持續(xù)性兩類。暫時(shí)性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響,如激烈運(yùn)動(dòng)后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測(cè)定值升高,有些恢復(fù)較慢,如ALT在停止運(yùn)動(dòng)1h后測(cè)定,其值仍可偏高30%~50%。
2.飲食
多數(shù)試驗(yàn)要求在采血前禁食12h,因?yàn)轱嬍持械牟煌煞挚芍苯佑绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果。
(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,進(jìn)食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。進(jìn)食高脂肪食物后采集的血液樣本,其血清會(huì)出現(xiàn)渾濁,可影響許多檢驗(yàn)測(cè)定的正確性。甚至喝含咖啡的飲料,可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)使GLU,蛋白質(zhì)降低,而膽紅素升高。
(2) 高脂餐后2~4h采血,多數(shù)人ALP含量增高,主要來(lái)自腸源性同工酶,且與血型有密切關(guān)系,O型或B型兼為L(zhǎng)e+分泌型者增高更為明顯。
(3) 高蛋白質(zhì)飲食可使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
(4) 高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數(shù)倍。
(5) 含咖啡因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。食物如含有動(dòng)物血液,可引起糞隱血假陽(yáng)性。
(6) 飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長(zhǎng)期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項(xiàng)作為嗜酒者的篩選檢查。
(7) 吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學(xué)方面亦有變化,白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。
3.藥物
藥物對(duì)檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜,在采樣檢查之前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停用,則應(yīng)了解可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。慶大霉素、氨芐青霉素可使谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加、維生素C可使血糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸嚴(yán)重降低。
4.體位
體位影響血液循環(huán),由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯,例如由臥位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時(shí),應(yīng)考慮門診和住院病人可能存在的結(jié)果差異,故采集標(biāo)本時(shí)要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。5.時(shí)間
病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān);膽固醇則在經(jīng)前期最高,排卵時(shí)最低;纖維蛋白原在經(jīng)前期最高,血漿蛋白則在排卵時(shí)減少。生長(zhǎng)激素于入睡后會(huì)出現(xiàn)短時(shí)高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時(shí)間應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行。
標(biāo)本采集是直接關(guān)系檢驗(yàn)結(jié)果的基本要素,如果標(biāo)本采集不當(dāng),即使最好的儀器設(shè)備也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時(shí)引入的誤差和錯(cuò)誤。
現(xiàn)將各種標(biāo)本的采集要點(diǎn)分述如下:
1.血液標(biāo)本
標(biāo)本采集注意事項(xiàng):
(1) 采靜脈血時(shí)止血帶結(jié)扎過(guò)久,可引起誤差。如以結(jié)扎1min的樣品結(jié)果為基數(shù),則結(jié)扎3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能使用止血帶。
(2) 血清標(biāo)本應(yīng)避免溶血。許多物質(zhì)紅細(xì)胞內(nèi)和血清中(血漿)的含量是不一樣的。如ALT紅細(xì)胞內(nèi)比血清高出數(shù)倍。血鉀、AST高出幾十倍,而HDH則高出百倍以上,一旦溶血,特別是嚴(yán)重溶血,造成血清(漿)中這些物質(zhì)的測(cè)定值增高,干擾測(cè)定結(jié)果。
細(xì)胞培養(yǎng)的樣品要采用無(wú)菌技術(shù),防止污染。
(4) 標(biāo)本采集后,必須在試管或容器上帖上檢驗(yàn)申請(qǐng)單號(hào)碼、住院病人應(yīng)有床號(hào)、姓名,且應(yīng)當(dāng)場(chǎng)核對(duì)無(wú)誤。
(5) 采血順序:摘自北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科《檢驗(yàn)樣本留取及采集指南》。
①血培養(yǎng)管,
②凝血項(xiàng)目管(藍(lán)帽),
③血沉管(黑帽),
④血清管(紅帽或黃帽),
⑤肝素血漿管(綠帽),
⑥EDTA 管(紫帽),
注:采用注射器采集血培養(yǎng)時(shí),厭氧瓶?jī)?yōu)先。
特殊情況采用蝶翼方式采血,且無(wú)血培養(yǎng)管時(shí),順序如下:
①凝血項(xiàng)目管(藍(lán)帽),
②血沉管(黑帽),
③血清管(紅帽或黃毛),
④肝素血漿管(綠帽),
⑤EDTA 管(紫帽),
注:采用蝶翼方式采集血培養(yǎng)時(shí),需氧瓶?jī)?yōu)先。
在實(shí)際工作中,如患者靜脈條件較差,有可能采血不足,血培養(yǎng)優(yōu)先考慮需氧管,其它管應(yīng)首先考慮凝血(藍(lán)帽)和血沉(黑帽)檢測(cè)管,因?yàn)檫@兩種標(biāo)本對(duì)血量要求最嚴(yán)格,且二者抗凝劑均為枸櫞酸鈉。
根據(jù)采集時(shí)間可分為清晨空腹尿、隨機(jī)尿、計(jì)時(shí)尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、癥狀典型時(shí)尿等。
(1) 晨尿?yàn)樽≡翰∪肆裟虻闹饕椒ǎ绯科鸫埠笫占谝淮文?,可用尿常?guī)檢驗(yàn)。
(2) 隨機(jī)尿多為門診就診病人的留尿檢驗(yàn)方法。
(3) 餐后尿?yàn)槭占M(jìn)餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代謝情況,用以篩查隱性糖尿病或輕癥糖尿病。
(4) 計(jì)時(shí)尿應(yīng)于計(jì)時(shí)開始時(shí)排空尿液,然后于規(guī)定時(shí)間內(nèi)至截止時(shí)間留尿,計(jì)時(shí)尿多用于腎功能和有形成分排出率的評(píng)估,亦用于計(jì)算淀粉酶或肌酐的排出率。
采集后及時(shí)送檢,如作原蟲阿米巴檢查應(yīng)保持一定的溫度,且立即送檢,立即檢查,如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣,而應(yīng)于晨起時(shí)排便前用棉拭擦肛門周圍,可得蟲卵。糞便標(biāo)本應(yīng)不污染容器外表,一般以無(wú)濾漏容器留取5~10g即可。
均由臨床醫(yī)師穿刺采樣,檢驗(yàn)科應(yīng)提供專用的各種試管或容器,及時(shí)送送檢。
5.痰液標(biāo)本
采集晨間第一口痰,多用于細(xì)胞學(xué)及微生物學(xué)檢查。采樣前應(yīng)先反復(fù)漱口,經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應(yīng)在抗生素等藥物治療開始之前,如已使用抗菌藥物,則應(yīng)選血液藥物濃度最低水平時(shí)采樣。
由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時(shí)送檢,否則影響滴蟲動(dòng)力,易于漏檢。
根據(jù)具體檢驗(yàn)項(xiàng)目而定,臨床醫(yī)師在開申請(qǐng)單前,應(yīng)同檢驗(yàn)科相關(guān)部門聯(lián)系并詢問(wèn)詳細(xì)后,注明檢查要求,再采樣并及時(shí)送檢。
總之,各種檢驗(yàn)標(biāo)本的采集合適與否,直接關(guān)系檢驗(yàn)質(zhì)量,應(yīng)予以重視。
三、標(biāo)本保存和運(yùn)送
標(biāo)本保存和運(yùn)送是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。由于采集的標(biāo)本受各種因素的影響,可能使檢驗(yàn)結(jié)果受或大或小的誤差,因此必須正確掌握標(biāo)本保存和運(yùn)送。標(biāo)本采集后盡量立即送檢,如在室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)造成血液成分的變化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血現(xiàn)象。
(1) 采樣后須立即送檢的常規(guī)項(xiàng)目:血氨、血沉、血?dú)夥治?、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細(xì)菌培養(yǎng),特別是厭氧菌培養(yǎng)。(2) 采樣后0.5h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目:血糖、電解質(zhì)、血液細(xì)胞學(xué)、凝血試驗(yàn)、體液細(xì)胞學(xué)、涂片找細(xì)菌、霉菌等。
(3) 采樣后1~2 h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目:各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測(cè)定等。